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一种基质胶及其制备方法和应用【异议或纠错】

档案编号: CQ-066-5433-8170
档案文号:
专利权人: 申请人 
发布时间: 发布时间 
档案分类: 专利权 
分 类 号: 第C12N5/071类
授权状态: 已授权
档案内容: 本发明涉及一种基质胶及其制备方法和应用,包括以下步骤:⑴配制培养基:在含10%胎牛血清的1640培养基中加入胶原蛋白;⑵重悬肉瘤细胞,然后接种;⑶将细胞培养瓶置于摇床中,将摇床整体置于细胞培养箱中37℃培养;⑷培养过程中,每3-5天进行换液,换液时,1000rpm离心5-10分钟,移去上清,然后使用步骤⑴所述培养基重悬;⑸培养14-28天后,收集细胞;1000rpm离心5分钟,移去上清;⑹加入脱细胞液重悬沉淀,2-8℃处理过夜;⑺高速离心30min,收集上清;⑻加入脱细胞液重悬洗涤后,高速离心30min,收集上清,重复本步骤洗涤3次;⑼将收集的上清液体合并,弃去沉淀;⑽合并后的液体使用透析液反复透析3-5次;⑾收集透析后液体,将液体浓缩至蛋白总浓度为10-15mg/ml即可得到基质胶。本发明方法保留了细胞外基质主要成分,有利于类器官培养。
附件下载:  (原始资料备查)

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